Samuel "Sam" Winchester es un cazador, junto con su hermano mayor Dean. Es uno de los principales protagonistas de Supernatural. Se ha argumentado que él es el más inteligente de los hermanos Winchester, aunque el propio Sam no estaría de acuerdo. Con el tiempo, Sam ha aceptado el estilo de vida de Caza y se ha sacrificado en repetidas ocasiones por el bien mayor, destacando su naturaleza desinteresada. Los hermanos Winchester cazan criaturas místicas y leyendas urbanas como los folklores Bloody Mary y Shapeshifters. En general, cada episodio gira en torno a una estructura relativamente uniforme, los hermanos encuentran un caso y lo resuelven. Aunque el hermano de Sam, Dean, ha sido el principal responsable de reunir pistas de caza en este momento, los episodios de precognición y telequinesis de Sam pronto los dirigen a donde tienen lugar varias de sus cacerías. Sam está en el último año de la Universidad de Stanford y está solicitando la facultad de derecho. Sam también tiene una novia, Jessica Moore, con quien vive y secretamente planea casarse. Una noche, Dean llega al departamento de Sam para buscar su ayuda después de la desaparición de su padre; aunque reacio al principio, Sam finalmente acompaña a su hermano.