Sarutobi Ayame es un ninja de Oniwabanshuu por entrenamiento, pero actualmente trabaja como asesino. Ella también tiene un trabajo de medio tiempo en el Café Kunoichi. Desde su aparición inicial, ella ha desarrollado una obsesión obsesiva con Sakata Gintoki, hasta el punto de acosarlo. Es severamente miope, hasta el punto de ser casi ciega (no puede distinguir los seres vivos de los objetos inanimados) sin sus anteojos. También se insinuó que ella no ve bien incluso con sus lentes puestos, ya que una vez confundió a Kagura (vestida como Gintoki) con el propio Gintoki. Sin embargo, esto podría deberse únicamente a su enamoramiento con él. Con frecuencia se ha enfrentado con Otae por varias razones. Ayame tiene una actitud juguetona, pero se pone seria cuando se trata de su trabajo. Ella también parece disfrutar de la esclavitud y S&M. Aunque Gintoki es indiferente a sus afectos e incluso la trata mal la mayoría de las veces (por ejemplo, arrojándole cosas cada vez que siente su presencia acosadora), su personalidad M o masoquista solo la hace disfrutar del castigo, y su crueldad solo sirve para alentarla.